PNAS | 番茄Rho敲除突变体可提高水分利用效率而不影响番茄产量

在全球变暖的情况下,在保持产量的同时提高作物的水分利用效率至关重要。然而,实现这种平衡是具有挑战性的,因为通过气孔减少水分流失的同时也会阻碍二氧化碳的吸收,损害植物的生长。近日,Mallikarjuna R. Puli 等在国际知名期刊《PNAS》上在线发表题为“Null mutants of a tomato Rho of plants exhibit enhanced water use efficiency without a penalty to yield”的研究论文。该研究发现,在温室和大规模田间试验中,敲除ROP9的番茄突变体表现出更强的水分利用效率,但不影响产量。ROP9调节活性氧的形成,它在rop9突变体中的缺失导致气孔ROS水平升高和气孔关闭增加。ROP可能是提高作物水分利用效率的目标。
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首先,该研究利用CRISPR/Cas9获得了SlROP9敲除番茄突变体,与野生型相比,rop9突变体表现出蒸腾速率、气孔导度和气孔孔径降低,光合CO2同化效率相当,瞬时水分利用显著提高的特点(图1)。而rop9突变体的气孔关闭增加是通过增加保卫细胞ROS水平介导的,而这很可能依赖于RBOH(图2)。
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图1.rop9突变体表现出蒸腾、气孔导度和气孔孔径的降低,对光合作用的影响最小。
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图2.在NADPH氧化酶的介导下,rop9突变体保卫细胞中ROS水平的升高导致气孔孔径的减小。

随后该研究又测试了各种已知的ABA响应,包括种子萌发、根伸长、基因表达和气孔关闭,发现rop9突变体气孔孔径变小和水分利用效率(WUE)提高与ABA响应增强没有直接联系,组成性高ROS水平、NADPH氧化酶活性和异常小的气孔孔径之间存在联系,ABA对rop9突变体保卫细胞孔径存在加性效应(图3)。ABA水平升高或在干旱条件下,ROP9的表达和活性会受到抑制,所以rop9突变体的表型可能是由rop9调控的RBOH活性中断引起的。
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图3.ROP9在调节气孔功能中表现出与ABA信号的加性相互作用。

为了评估rop9突变体气孔导度和蒸腾速率降低对果实产量的影响,该研究进行了大规模田间试验,田间试验结果表明,rop9突变体的水分利用效率(WUE)的提高并不与产量损失相关,甚至在某些土壤生长条件下可能导致产量的提高(图4)。
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图4.田间生长的rop9突变体果实产量和含糖量分析。

研究结果概要:

(A)在水分充足的野生型植物(WT)中,ROP9抑制保卫细胞中RBOHB/D的功能,导致低水平的ROS。ABA水平和依赖ABA的信号也可能很低,导致气孔开放。干旱导致ROP9表达减少,ABA可能导致ROP9失活,导致RBOH依赖的ROS形成增加。ROS水平升高,结合ABA依赖的信号传导,促进气孔关闭。(B)在rop9突变体中,RBOH依赖的ROS水平增加导致部分气孔关闭。外源ABA的应用进一步激活ABA信号,ABA信号与增加的ROS水平共同作用,促进气孔关闭。(C)对单个气孔和保卫细胞的分析证实,与WT植物相比,水分充足的rop9突变体的气孔导度(gws)和蒸腾作用(E)更低,表明突变体的气孔孔径更小。有趣的是,rop9突变体的光合CO2同化作用(AN)与WT M82相似,从而提高了突变体的水分利用效率(WUE)。(D)全植物蒸腾(E)分析表明,与M82相比,水分充足的rop9突变体表现出更低的蒸腾作用,特别是在正午,当水汽压亏缺(VPD)值增加时。
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文章来源:植物生物技术Pbj
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