接下来，作者测试了含盐量是否会影响SOS3与GI之间的相互作用，co-IP显示了GI-HA和SOS3-MYC的相互作用。100mMNaCl和3mM钙离子处理增强了这种相互作用，而EGTA抑制了这种相互作用。此外，与钙离子结合的EF-hand基序中缺失三个氨基酸的突变蛋白SOS3-1未能与GI相互作用（图三）。

图三：SOS3与GI的盐和Ca2+依赖性相互作用

最后，BIFC 证明FKF1和SOS3蛋白在细胞质和细胞核中结合在一起。SOS3在常规和生理盐水条件下都降低了GI和FKF1的水平。接下来，标记蛋白GI-HA、FKF1-MYC和SOS3-FLAG在本氏烟草叶片中共表达并进行co-IP。与gi突变体相似，fkf1突变体表现出延迟开花，与盐处理无关。然而，与对GI含量的影响相比，含盐量对FKF1蛋白含量的影响较小。这些结果表明SOS分别和GI和FKF1相互作用（图四）。

图四：SOS3与FKF1相互作用

综上所述，SOS3与这些蛋白质相互作用的证据表明，SOS3可能存在于调控CO转录的转录复合体中。S-酰化使SOS3核易位与GI-FKF1复合体结合，从而控制盐胁迫下CO的表达，从而影响开花时间。

文章来源：植物生物技术Pbj